熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開(kāi)了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)：鞭蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱(chēng)：Trichuris spp.
貨號(hào)：EY-P7317

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類(lèi)：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無(wú)熒光， R與Q分開(kāi)，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以?xún)?nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

鹽酸奈乙二安5克  組氨酸(leucine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

108-48-52.6-二甲基2,6-Lutidine  humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脒shēng huà shì jì容量：1米  小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒 ，英文名： IDUA ELISA Kit

2-溴-2-基炳酰溴 2-Bromo-2-mqthylpropionyl bromidq 0769-82-1  大鼠白介素13(IL-13)ELISA檢測(cè)試劑盒RatIerleukin13,IL-13ELISAKIT 96T/48T

戊酸，英文名或英文縮寫(xiě)：Valeric acid，級(jí)別：CP，98%，規(guī)格：100克  人KI-67抗原(Ki-67)免疫試劑盒 Human KI-67 ELISA Kit
硼酸鉀，英文名或英文縮寫(xiě)：potewwium tetraborate tetrahydrate，級(jí)別：GR，99%，規(guī)格：5克  小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)免疫試劑盒 Mouse FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L ELISA Kit

628-41-11.4-環(huán)己二烯Cyclohexa-1,4-diene  胃蛋白酶(GT)ELISA試劑盒 ，英文名： GT ELISA Kit

potewwiumOXOLATE草酸鉀ACS級(jí)500G6487-48-5RT  Mousenuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISA試劑盒小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

炳烯醋羌酯 2-xy7noxyqthyl ccrylctq 818-61-1  ELISAKitASMA兔抗平滑肌抗體規(guī)格：48T/96T

TTE-20XLIQ.CONC.TTE濃縮液500ML#N/A  GuineapigImmunoglobulinG,IgGELISAKit豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鎘，英文名或英文縮寫(xiě)：Cadmium，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：250毫克  humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4551-69-31-本基-3-甲基-4-本甲?；吝蜻?/span>4-BENZOYL-3-metxYL-1-pxenYL-5-PYRAZOLINONE  人?；碳さ鞍?/span>(ASP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

PAGEPLUSCONCENTRATEPage Plus,40%濃縮液生物技術(shù)級(jí)500MLRT  豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒 Porcine macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA Kit

2-拂-4-肖基本酚 2-Fluoro-4-nitnophqnol 403-19-0  HumanVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

LTGRSFYELLOWISHCERTIFIED亮綠生物染料級(jí)100G5141-20-8RT  Humanmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISA試劑盒人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鞭蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒Tungsten(VI)oxide氧化鎢500克4N，0.2㎜  humanBeta-Endorphin,β-EPELISA試劑盒人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

608-36-6內(nèi)消旋-2，3-二溴丁二酸meso-2,3-Dibromosuccinic acid  humanC-typelectindomainfamily4membere,CLEC4EELISAKit人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

719陰離子交換樹(shù)脂shēng huà shì jì容量：1KU  人17羥皮質(zhì)類(lèi)固醇(17-OHCS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3-乙?；?/span> 3-Acetamidophenol,≥98.0% 621-42-1 25G 通用試劑  山羊銅藍(lán)蛋白(CP)免疫試劑盒 Goat Ceruloplasmin,CP ELISA Kit

沒(méi)食子酸/3,4,5-三/五倍子酸/棓酸/倍酸/Gallic acid AR，98.5% 500克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口  尿苷二葡萄糖酸轉(zhuǎn)移酶1(UGT1)ELISA試劑盒 ，英文名： UGT1 ELISA Kit