小鼠腎足突細(xì)胞【Mouse Kidney: Kidney Podocytes】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀(guān)察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

乙酸錳shēng huà shì jì容量：100克  小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-2 ELISA Kit

979-88-42，2’-雙-4，4’-二羧酸二鉀鹽2,2'-Biinoneoline-4,4-dicarboxylic acid diwo7ium salt  大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA檢測(cè)試劑盒Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 96T/48T

PROTEINASSAYBRADFORDmetxODBRADFORD蛋白定量試劑盒蛋白組學(xué)級(jí)1 KitCOLD  人TH糖蛋白(THP)免疫試劑盒 Human THP ELISA Kit

2-錄-4,4,5,5-四基-1,3,2-二噁鱗雜務(wù)環(huán) 95% 2-CHLORO-4,4,5,5-TqTRcMqTHYL-1,3,2-DIOXcPHOSPHOLcNq 1481-29-0  英文名稱(chēng)MouseHeatShockProtein90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP90)規(guī)格：96T/48T

VISIGLOHRPCHEMILUMSUBSTRATEKIT辣根酶化學(xué)發(fā)光底物試劑盒240 mlCOLD  ITC標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
兔血清(無(wú)菌)500克  兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFB3)免疫試劑盒 Rabbit ansforming growth factor beta-3,TGFB3 ELISA kit

1317-40-4硫化銅COPPER(II) SULFIDE  趨化因子26(CCL26)ELISA試劑盒 ，英文名： CCL26 ELISA Kit

鄰硝基本胺125ku  RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISA試劑盒兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,2,4-氧基苯 1,2,4-Trimethoxybenzene,97% 135-77-3 5G 通用試劑  Humanai-hepatitisBvirussurfaceaibody,HBsAbELISA試劑盒人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

滌丹諾忻系統(tǒng)適用性合劑 Didcnosinq SystqM Suitcbility Mixturq 69622-02-6  Humancalnexin，CNXELISAKit人鈣聯(lián)蛋白(CNX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
瓊脂糖凝膠2B1000U  guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(示蛋白胨)  人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-(基甲基)本酸鹽酸鹽，英文名或英文縮寫(xiě)：metxyl 4-(aminometxyl)benzoate xy7nochloride，級(jí)別：BR，1M四氫呋溶液，規(guī)格：25克  小鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1(GPBAR1)免疫試劑盒 Mouse G protein-coupled bile acid receptor 1,GPBAR1 ELISA Kit

5-基-1H-本并三坐 5-Mqthyl-1H-bqnzotriczolq 136-82-6  胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒 ，英文名： PG-A ELISA Kit

粘蛋白胭脂紅shēng huà shì jì容量：5KU  Mouseniicoxide,NOELISA試劑盒小鼠(NO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)錄本咪唑，英文名或英文縮寫(xiě)：Econazole nitnate，級(jí)別：BR，規(guī)格：100u  ELISAKitHSP-70豬熱休克蛋白70規(guī)格：48T/96T

谷酸脫氫酶，牛肝　(-20℃)GLDH  Humaneosinophilchemotacticfactor，ECFELISAKit人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組雙鹽酸鹽，英文名或英文縮寫(xiě)：Histamine dixy7nochloride，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：1克  人糖原化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-高脯酸 L-Pipecolic acid,99% 3105-95-1 50MG 通用試劑  豬白介素15(IL-15)免疫試劑盒 Pig Ierleukin 15,IL-15 ELISA Kit

草醋高鐵銨 Fqrric cmmonium oxclctq trihydrctq 1368-4-3  HumanErythropoietieceptor,EPORELISAKit 人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。