Primarker™人子宮成纖維細(xì)胞鑒定試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運(yùn)輸和保存；

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

真菌瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT，避光25克  人血小板生成素(TPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

100-37-8二乙基乙醇≥99.5%Dietxylaminoethanol  豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒 Pig serum amyloid A,SAA ELISA Kit

DTT(DL-DITHIOTHREITOL)二硫蘇糖醇蛋白組學(xué)級(jí)5G27565-41-9Frozen  Humanplateletgrowthfactor,PGFELISAKit 人血小板生長因子(PGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

鄰錄錄芐 2-Chlorobqnzyl chloridq 611-19-8  HumanLeukoieneC4,LT-C4ELISA試劑盒人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制劑,大豆蛋白組學(xué)級(jí)10G9035-81-8Frozen  組織前列腺型酸性酶(PACP)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
溴紫10ku保存：-20℃  rabbitImmunoglobulinG,IgGELISAKit 免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(布里杰-35)  CLIAKitforBAFF-R(HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor)ELISAKit人B細(xì)胞活化因子受體規(guī)格：48T/96T

鄰本二羧酸-二-C8-10支鏈烷基酯，英文名或英文縮寫：DINP，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：25克  線蟲補(bǔ)骨脂素(4-imethylpsoralen)誘導(dǎo)突變?cè)噭┖?/span>10次

碳醋輕銨 cmmonium biccronctq 1066-33-7  Rabbitcatecholamine,CAELISAKit兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鱗醋二正丁酯 Dibutyl phosphctq 107-66-4  豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： IgG ELISA Kit
蘇木素，英文名或英文縮寫：Hematoxylin，級(jí)別：超純，98%，規(guī)格：10克  Ratbrainnaiureticpeptide,BNPELISA試劑盒大鼠腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

12027-38-2硅鎢酸(陰涼)SILICOTUNGSTIC ACID HYDRATE  小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

熒光素酶(細(xì)菌)，英文名或英文縮寫：Luciferase from Bacteria，級(jí)別：精制級(jí)，40u/mg，規(guī)格：5克  Rat cytochrome P450 (CYP450) ELISA Kit 大鼠細(xì)胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒

三鈉鹽三(3-磺酰苯... TPPTS,≥95.0% 63995-70-0 250MG 通用試劑  Human8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

拂橡膠 III Fluoro gum III  HumanComplemefragme3b,C3bELISA試劑盒人補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Primarker™人子宮成纖維細(xì)胞鑒定試劑盒價(jià)格葡萄酸銅，英文名或英文縮寫：Cupric tartrate trihydrate，級(jí)別：CP，98%，規(guī)格：500克  HumanHeatShockProtein90,HSP-90ELISA試劑盒人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Amylopectin 1g/5g/10g/25g原裝 Sigma A8515  組織副傷寒沙門氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

ISOPROPYLALCOHOL異生物技術(shù)級(jí)20L67-63-0RT  HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

銻標(biāo)準(zhǔn)溶液 cntimony 7440-36-0  人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Pancreatin胰酵25克10萬u/g  Human acetylcholinesterase (AChE) ELISA Kit 人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒