小鼠腎動脈組織提取物【Kidney: Normal Mouse Renal Artery Derivatives】

腎臟為成對的扁豆?fàn)钇鞴?，位于腹膜后脊柱兩旁淺窩中。腎動脈左右各一，由腹主動脈垂直分出，在腸系膜上動脈下方1-2cm,第1、2腰椎之間發(fā)出，分別經(jīng)腎門入左、右腎。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠腎動脈組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

D-氨基蟲熒光素mgGlimepiride934797格列美脲

D-蟲熒光素游離酸25mgN-Demethylricinine216428

D-蟲熒光素鉀鹽25mgm-Nitrohydrocinnamic acid16647

D-蟲熒光素鈉鹽1gN-(2-Hydroxyethyl)-(4-nitrophenyl)propylamine16349

5-FITC; R isomer5mgp-Nitrohydrocinnamic acid166429
Dantron  117-10-2  中文名：1,8-二羥基蒽醌  分子式：C14H8O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  掌葉大黃; 金雞納樹; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠趨化因子 (mouse RAES)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 Biosource

Danshenxinkun A  65907-75-7  中文名：丹參新醌甲  分子式：C18H16O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  細(xì)胞毒活性; 鼠尾草屬; 二萜醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠干細(xì)胞因子 (mouse SCF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

Damnacanthal  477-84-9  中文名：虎刺醛  分子式：C16H10O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶II; 鎮(zhèn)痛; 抗炎; 抗癌; 海巴戟; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  mouse SDF-1 a   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

Dabigatran etexilate benzenesulfonate  1019206-65-5  中文名：苯磺酸達(dá)比加群酯  分子式：C40H47N7O8S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠可溶性 E- 選擇素 (mouse sE-Selectin/ sCD62E)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D  

Dabigatran etexilate  211915-06-9  中文名：  分子式：C34H41N7O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠羥脯酸(Hyp)ELISA試劑盒
攀登魚藤異黃酮 HPLC≥98% 5mg protein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISA試劑盒單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

泡桐素 HPLC≥98% 5mg PROTEINASEK酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒50

霹靂蘿芙辛堿 HPLC≥98% 5mg pSHTLE+目的基因腺病毒穿梭載體

啤酒甾醇 HPLC≥98% 5mg pSilencer-NEO+SiRNASiRNA表達(dá)

匹西狄醇A HPLC≥98% 5mg PUREBRANE護(hù)手露10毫升/瓶

葡萄醇 D HPLC≥98% 5mg PVELISA試劑盒魚卵黃高0蛋白規(guī)格：96T/48T

蒲公英賽酮 HPLC≥98% 5mg PVP封片液10毫升

齊墩果酸乙酸酯 HPLC≥98% 5mg pYES+目的基因釀酒酵母表達(dá)

千層塔烯二醇，鋸齒石松烯二醇，山芝烯二醇 HPLC≥98% 5mg pZERO+目的基因克隆基因

千金藤堿 HPLC≥98% 5mg pZERO載體克隆鑒定試劑盒20
小鼠腎動脈組織提取物價格生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  17β-Hydroxy-17-methylandrosta-4,9(11)-dien-3-one  中文名：17β-羥基-17-甲基雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮  分子式：C20H28O2  度：98.0%

腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  19041-66-8  中文名：17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮  分子式：C26H30O3  度：98.0%   

神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒     9-Aminominocycline hydrochloride  149934-21-4  中文名：  分子式：C23H29ClN4O7 

神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISAKit     9-Hydroxy-4-androstene-3,17-dione  560-62-3  中文名：9-羥基-4-雄甾烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3  度：98.0%   

神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  17α-Neriifolin  中文名：  分子式：C30H46O8  度：98.0%

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。