小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞提取物【Mouse Skin: Normal Epidermal Keratinocytes Derivatives】

小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞提取物是從小鼠原代表皮角質(zhì)形成細(xì)胞提取的，小鼠原代表皮角質(zhì)形成細(xì)胞從正常小鼠皮膚組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

口蹄疫3ABC病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Ethyl glucoside31989乙基葡萄糖苷

豬乙腦病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Ethyl chlorogenate42582綠原酸乙酯

豬弓形蟲病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Ethyl 5-amino-cyano-(2-ethoxy-oxoethyl)thiophene-carboxylate5816

豬細(xì)小病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Ethyl 3-cyclopropyl-oxopropanoate249222

豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測試紙條卡/包，包/盒Ethyl 3,5-di-O-caffeoylquinate145143,5-二咖啡?？鼘幩嵋阴?/span>
Hydroxyprogesterone acetate  中文名：醋酸羥孕酮  分子式：C23H32O4  度：98.0%  小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Methylprednisolone hemisuccinate  中文名：  分子式：C26H34O8  度：98.0%  小鼠抑瘤素mouse  M(mouse OSM)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  

Methylprednisolone acetate  中文名：甲基潑尼松龍醋酸酯  分子式：C24H32O6  度：98.0%  小鼠6--前列腺素F1a(mouse 6-k-PGF1a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione  中文名：  分子式：C22H30O4  度：98.0%  小鼠前列腺素E2(mouse PGE2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Methylprednisolone  中文名：甲基潑尼松龍  分子式：C22H30O5  度：98.0%  小鼠0脂酶A2(mouse sPLA2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝
腺苷激酶抑制劑  Adenosine Kinase Inhibitor  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanFibronectinELISAKit人纖維連接蛋白(FN)規(guī)格：96T/48T

2-氨基腺苷  2-Amino Adenosine  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanFIIELISAKit人凝血因子II(FII)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

5'-乙基酰胺基-2',3'-亞異丙基腺苷  5'-Ethylcarboxamido-2',3'-isopropylidene Adenosine  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanFIXELISAKit人凝血因子IX(FIX)規(guī)格：96T/48T

別嘌醇核苷  Allopurinol riboside  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanFIXELISAKit人凝血因子IX規(guī)格：96T/48T

N-乙酰兩性霉素B  N-Acetyl Amphotericin B  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanFlt-3ELISAKit人Flt-3規(guī)格：96T/48T

血管緊張素 片段1-7醋酸鹽水合物  Angiotensin Fragment 1-7 acetate salt hydrate  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanFLT3ELISAKIT人FMS樣酪氨酸激酶3(FLT3)規(guī)格：96T/48T

[Val5]-血管緊張素 II 醋酸鹽水合物  [Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate   質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanFlt-3ligandELISAKit人Flt-3配體(Flt-3ligand)規(guī)格：96T/48T

阿替洛爾酸  Metoprolol Acid  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanFollistatinELISAKit人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(R)-(+)-阿替洛爾  (R)-(+)-Atenolol  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanFractalkineELISAKit人Fractalkine規(guī)格：96T/48T

S-(-)-阿替洛爾  S-(-)-Atenolol  質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanFree-T3ELISAKit游離*狀腺原氨酸(Free-T3)規(guī)格：96T/48T
小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞提取物說明書綿羊球蛋白A   英文名稱：   Immunoglobulin A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IgA  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol  中文名：3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇  分子式：C21H32O2  度：93.0%

綿羊促卵泡生成激素   英文名稱：   Follicle Stimulating Hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FSH  3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one  766-36-9  中文名：  分子式：C7H11NO 

綿羊白介素2(IL-2)ELISAKit                 Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3 

綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒   綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒、綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  972-46-3  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2 

綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit     Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3  度：98.0%

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。