小鼠皮下脂肪細(xì)胞提取物【Mouse Fat: Normal Subcutaneous Fat CellsDerivatives】

小鼠皮下脂肪細(xì)胞提取物是從小鼠原代皮下脂肪細(xì)胞提取的，小鼠原代皮下脂肪細(xì)胞從正常小鼠脂肪組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

口蹄疫病毒Asia-I型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Phomaligol A15242

口蹄疫病毒O型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Phenytoin571苯妥英

口蹄疫病毒A型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Phenformin1146苯乙雙胍

口蹄疫病毒C型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Phenformin hydrochloride8348鹽酸苯乙雙胍

布魯氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒/Perospirone hydrochloride1292738鹽酸哌羅匹隆
Hypocrellin A  77029-83-5  中文名：竹紅菌甲素  分子式：C30H26O10    HumanPerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit人抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Shikonin  517-89-5  中文名：紫草素  分子式：C16H16O5    兔子球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Triptoquinone A  142950-86-5  中文名：  分子式：C20H24O4    Human cardiac oponin I (cTn- I) ELISA Kit 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒

2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  103646-20-4  中文名：  分子式：C11H7NO4    Humanai-Bburgdorleriaibody,BB-AbELISAKit 人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Rubioncolin C  132242-52-5  中文名：  分子式：C27H22O6    HumanE-Cadherin,E-CadELISA試劑盒人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
香草醛（標(biāo)準(zhǔn)品）  Vanillin   質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒 ，英文名： PLAUR/uPAR ELISA Kit

香草醛  Vanillin   質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒 ，英文名： uPA ELISA Kit

膽維?。?biāo)準(zhǔn)品）  VITAMIN D4  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)ELISA試劑盒 ，英文名： uPAR ELISA Kit

葡醛酸鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）  4-FLUOROCINNAMONITRILE  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠尿嘧啶核苷0酸化酶1(UPP1)ELISA試劑盒 ，英文名： UPP1 ELISA Kit

鹽酸羥胺（標(biāo)準(zhǔn)品）  Hydroxylammonium chloride  質(zhì)量規(guī)格：檢查 小鼠尿皮質(zhì)素1(UCN1)ELISA試劑盒 ，英文名： UCN1 ELISA Kit

鹽酸雙環(huán)胺（標(biāo)準(zhǔn)品）  DICYCLOMINE HYDROCHLORIDE  質(zhì)量規(guī)格：供TCL鑒別用 小鼠尿皮質(zhì)素2(UCN2)ELISA試劑盒 ，英文名： UCN2 ELISA Kit

氯解磷定（標(biāo)準(zhǔn)品）  2-Pyridinealdoxime methochloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠尿皮質(zhì)素3(UCN3)ELISA試劑盒 ，英文名： UCN3 ELISA Kit

鹽酸賽庚啶（標(biāo)準(zhǔn)品）  CYPROHEPTADINE HYDROCHLORIDE  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠尿調(diào)蛋白(UMOD)ELISA試劑盒 ，英文名： UMOD ELISA Kit

（標(biāo)準(zhǔn)品）  Amidopyrine/aminopyrine  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ，英文名： ALB ELISA Kit

沙利度胺（標(biāo)準(zhǔn)品）  Thalidomide  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠皮下脂肪細(xì)胞提取物培養(yǎng)錳快速測(cè)試盒   Manganese rapid test case  Ranitidine  中文名：雷尼替丁  分子式：C13H22N4O3S 

錳過氧化物酶（MnP）測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/24樣  Prasugrel  中文名：普拉格雷  分子式：C20H20FNO3S 

錳測(cè)試盒   Manganese test case  4-[2-[(3-Ethyl-4-methyl-2-oxo-3-pyrrolin-1-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide  119018-29-0  中文名：  分子式：C16H21N3O4S 

霉素檢測(cè)試紙條（液態(tài)樣品）   Chloramphenicol detection test sip (liquid sample)                 Pidotimod  121808-62-6  中文名：匹多莫德  分子式：C9H12N2O4S 

霉(AFT)ELISAKit                 Triptoquinone A  142950-86-5  中文名：  分子式：C20H24O4