小鼠內(nèi)臟脂肪組織提取物【Fat: Normal Mouse Visceral Fat Derivatives】

內(nèi)臟脂肪組織是人體脂肪中的一種，與皮下脂肪不同，它圍繞著人的臟器，主要存在于腹腔內(nèi)。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠內(nèi)臟脂肪組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

DNA Marker VI（20000bp）   0次6-O-Feruloylglucose13788756-O-阿魏酰葡萄糖

DNA Marker VII（00bp）  0次6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose233746-O-對羥基苯甲酰葡萄糖

DNA Marker 圖譜  6-Hydroxystigmasta,22-dien-one3641

pUC18/MspI（31bp）   次/次 6-Hydroxyrubiadin8768666-羥基甲基異茜草素

λ DNA/HindIII（12531bp）  0次6-Fluoro-(4-piperidinyl),2-benzisoxazole hydrochloride841633
D(-)-Arginine  157-06-2  中文名：D-精氨酸  分子式：C6H14N4O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒  

Cyromazine  66215-27-8  中文名：環(huán)丙氨嗪  分子式：C6H10N6  度：98.0%      小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒  

Cyproterone acetate  427-51-0  中文名：醋酸環(huán)丙氯地孕酮  分子式：C24H29ClO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒           

Cyproheptadine hydrochloride  969-33-5  中文名：鹽酸賽庚啶  分子式：C21H22ClN  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISAKit  

Cynatratoside A  97399-96-7  中文名：白薇苷A  分子式：C28H40O8  度：98.5%  關(guān)鍵詞：  抗炎; 白薇; 白前; 孕甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠N端前腦素(-proBNP)ELISAKit
檸檬酸酯B HPLC≥98% 20mg ELISAKitTP人胸腺嘧啶核苷0酸化酶規(guī)格：48T/96T

檸檬酸酯C HPLC≥98% 20mg ELISAKitTSA人腫瘤特異性抗原規(guī)格：48T/96T

檸檬酸酯E HPLC≥98% 20mg ELISAKitTSC22人轉(zhuǎn)化生長因子β刺激蛋白22規(guī)格：48T/96T

牛蒡苷元 HPLC≥98% 20mg ELISAKitTSGF人特異生長因子/相關(guān)因子規(guī)格：48T/96T

牛蒡子苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitTSLP人胸腺基質(zhì)細(xì)胞生成素規(guī)格：48T/96T

?；悄懰徕c HPLC≥97% 20mg ELISAKitTSLP人胸腺基質(zhì)細(xì)胞生成素規(guī)格：48T/96T

牛磺鵝去氧膽酸 HPLC≥98% 20mg ELISAKitTSP-1人血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1規(guī)格：48T/96T

?；撬?/span> HPLC≥98% 20mg ELISAKitTS人胸苷酸合成酶規(guī)格：48T/96T

牛磺熊去氧膽酸 HPLC≥98% 20mg ELISAKitTTV人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒規(guī)格：48T/96T

牛膝甾酮 HPLC≥98% 10mg ELISAKitTX-A2人血栓素A2規(guī)格：48T/96T
小鼠內(nèi)臟脂肪組織提取物說明書細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒     Acetophenone tosylhydrazone  4545-21-5  中文名：苯乙酮對甲苯磺?；?/span>  分子式：C15H16N2O2S 

細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin  中文名：1-芐基-5-乙氧基海因  分子式：C12H14N2O3  度：98.0%

細(xì)胞間粘附分子2elisa試劑盒   細(xì)胞間粘附分子2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   細(xì)胞間粘附分子2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：細(xì)胞間粘附分子2試劑盒、細(xì)胞間粘附分子2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Abscisic acid  14375-45-2  中文名：脫落酸  分子式：C15H20O4  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒     Abscisic acid  中文名：脫落酸  分子式：C15H20O4  度：99.0%

細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit     9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  117344-32-8  中文名：9,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴  分子式：C29H26O4

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。