小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞提取物【Mouse Embryo: Normal Fetal Epidermal Keratinocytes Derivatives】

小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞提取物是從小鼠原代胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞提取的，小鼠原代胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞從正常小鼠胚胎組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

枯草芽孢桿菌DL1mlAcetyl meldrum's acid8593

糞球菌GIRF1mlAcetophenone tosylhydrazone45451苯乙酮對甲苯磺酰基腙

糞球菌OGIRF1mlAcetoacetanilide21乙酰

pP1C.3 with DNA Recombinase（單子葉植物敲除Abscisic acid143755脫落酸

pP1C.34μgAbiraterone acetate1542298乙酸阿比特龍酯
Ilaprazole  172152-36-2  中文名：艾普拉唑  分子式：C19H18N4O2S  度：98.0%      小鼠松弛素   英文名稱：   Mouse Relaxin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   RLN

Ikshusterol 3-O-glucoside  112137-81-2  中文名：  分子式：C35H60O7  度：%  關(guān)鍵詞：  異株蕁麻; 豆甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit  

Hypocrellin A  77029-83-5  中文名：竹紅菌甲素  分子式：C30H26O10  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  抗艾滋病毒; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISAKit  

Hydroxyprogesterone acetate  302-23-8  中文名：醋酸羥孕酮  分子式：C23H32O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISAKit  

Hydroxyprogesterone  68-96-2  中文名：羥孕酮  分子式：C21H30O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISAKit
香草酸  Vanillic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98% 小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒 ，英文名： PTH ELISA Kit

香蒲新苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Typhaneoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

香葉木素-7-O-葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA檢測試劑盒MouseParathyroidHormone-LikeRelatedProtein,PTHrPELISAKit 96T/48T

香紫蘇醇(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sclareol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒 ，英文名： PTHrP ELISA Kit

小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  Berberine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀旁腺素受體2(PTHR2)ELISA試劑盒 ，英文名： PTHR2 ELISA Kit

新補骨脂異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Neobavaisoflavone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

新橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Neohesperidin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒 ，英文名： TPO ELISA Kit

新穿心蓮內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Neoandrographolide  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀腺激素受體交互子6(IP6)ELISA試劑盒 ，英文名： IP6 ELISA Kit

新芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Neomangiferin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒 ，英文名： TBG ELISA Kit

熊果苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Arbutin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞提取物價格酶（CAT）檢測   Catalase (CAT) detection                 Rasagiline mesylate  161735-79-1  中文名：甲磺酸雷沙吉蘭  分子式：3S 

酶（CAT）測定試劑盒（可見光法）  Ribavirin  中文名：利巴韋林  分子式：C8H12N4O5 

馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Stigmast-4-ene-3β,6β-diol  中文名：豆甾-4-烯-3β,6β-二醇  分子式：C29H50O2  度：93.0%

馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(-PCR法)   48T                 Stigmast-4-ene-3β,6β-diol  中文名：豆甾-4-烯-3β,6β-二醇  分子式：C29H50O2 

麻風(fēng)桿菌(ML)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  3-Amino-4-hydroxybenzoic acid  1571-72-8  中文名：3-氨基-4-羥基苯甲酸  分子式：C7H7NO3