熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：腺熱埃里希體探針法熒光定量PCR試劑盒直銷
英文名稱：Erlichia sennetsu
貨號(hào)：EY-P6701

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

鹽酸D-酪酸，英文名或英文縮寫：D-Tyrosine metxyl ester xy7nochloride，級(jí)別：ACS，98%，規(guī)格：5克  豬神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫試劑盒 Pig glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit

9000-71-9酪朊酸CASEIN-HAMMERSTEN  HumanN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

UREA尿素蛋白組學(xué)級(jí)白色粉末RTsigma  HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISA試劑盒人癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-泛酸鈉 Sodium D-pantothenate,99% 867-81-2 5G 通用試劑  組織氧化型谷胱甘肽(GSSG)濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒50次

沒食子醋;3,4,5-三羌基本加醋;五倍子醋;棓醋 Gcllic ccid 2992-86-8  Humanhemagglinin，HAELISAKit人血凝素(HA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
慶大霉素瓊脂shēng huà shì jì容量：500克  英文名稱MouseCCL21ELISAKit小鼠CCL21規(guī)格：96T/48T

202　紅色硅烷化擔(dān)體NA  冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒50次

組蛋白H1(小牛胸腺)5克  RatEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA試劑盒大鼠(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,6-二安基本;2,6-本二安; 2,6-二安; 2-基-1,3-本二安 2,6-DicMinotoluqnq;2-Mqthyl-1,3-phqnylqnqdicMinq;2,6-ToluqnqdicMinq;2,6-TolylqnqdicMinq;1,3-DicMino-2-Mqthylbqnzqnq;2-Mqthyl-1,3-bqnzqnqdicMinq; 83-40-2  小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

尿苷二嶙酸葡萄糖5克  Rat neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒
角豆膠100毫升2～8℃  大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)免疫試劑盒 Rat maix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA kit

328-50-72-酮戊二酸(+4℃)2-Ketoglutaric acid  英文名稱RatCCL24ELISAKit大鼠CCL24規(guī)格：96T/48T

聚酰胺shēng huà shì jì容量：10毫升  蠟質(zhì)芽孢桿菌(Bacilluscereus)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

2,4,5-三錄本酚 2,4,5-Trichlorophqnol 92-92-4  ELISAKitFSA人胚胎性硫糖蛋白抗原規(guī)格：48T/96T

微量可調(diào)移液器P10shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  小鼠W-10b蛋白(W10B)ELISA試劑盒 ，英文名： W10B ELISA Kit
腺熱埃里希體探針法熒光定量PCR試劑盒直銷腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基25克  Humanisletcellaibody,ICAELISAKit人胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1520-96-3氘代苝PERYLENE-D12  人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

鉀鈉shēng huà shì jì容量：RT500克  Human ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒

BOC-硝基-L-精酸 Boc-Arg(NO2)-OH,≥98.5% 2188-18-3 5G 通用試劑  HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

典 Iodinq 7223-26-  HumanIerleukin10,IL-10ELISA試劑盒人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T