冷凍保存細(xì)胞之方法：
小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)說明書
形態(tài)特性成纖維細(xì)胞樣

生長特性貼壁生長

特征特性L-M(TK-)細(xì)胞是L-M（ATCCCCL-1.2）細(xì)胞系的衍生株，具有抗5-溴脫氧尿核苷（5-bromo-2-deoxyuridine,BUdR）、缺乏胸腺嘧啶核苷激酶（thymidinekinasemutant）的特性，廣泛用于遺傳學(xué)、生物化學(xué)基礎(chǔ)研究。也可用在體細(xì)胞雜交、基因轉(zhuǎn)移等實驗研究中。

培養(yǎng)條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況C36

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測陰性

STR

同工酶同工酶鑒定

染色體

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)說明書準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
?1.一般客戶拿到小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)說明書后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA)(5×105)

人牙齦成纖維細(xì)胞總RNAHGF NA

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21

小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);LA1-GFP 小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細(xì)胞 Human

CPA1 Others Human 人 Carboxypeptidase-A1 / CPA1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)說明書*AM(Adrenomedullin;ADM)腎上腺髓質(zhì)素（多肽抗原）規(guī)格：0.1mg

*5-HTR1A(5-HT1A(5-hydroxytryptamine/serotoninreceptor1A;5HT1a;ADRBRL1;ADRB2RL1;HTR1A)5-羥色胺受體1A(多肽)規(guī)格：0.5mg

*TIMP-2(TissueInhibitorofMetalloproteinase-2)金屬蛋白酶組織抑制因子-2(抗原)規(guī)格：0.5mg

*TIMP-3(TissueInhibitorofMetalloproteinase-3)金屬蛋白酶組織抑制因子(抗原)規(guī)格：0.5mg

*ADMR,Adrenomedullinreceptor腎上腺髓質(zhì)素受體（抗原）規(guī)格：0.5mg

*VTG(vitellogenin)青鳉魚卵黃蛋白規(guī)格：0.1mg

*Apaf-1(Apoptosisproteaseactivatingfactor-1)(CT)凋亡蛋白活性因子-1（抗原）規(guī)格：0.5mg

*Apaf-1(Apoptosisproteaseactivatingfactor-1)(NT)凋亡蛋白活性因子-1（抗原）規(guī)格：0.5mg

*AR(AndrogenReceptor)peptide雄激素受體（多肽抗原）規(guī)格：0.5mg

*5-HTR2A5-羥色胺受體2A抗原規(guī)格：0.5mg
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