人心肌組織提取物【Cardiac: Normal Human Cardiac Derivatives】 心主要由心肌構(gòu)成,是連接動(dòng)、靜脈的樞紐和心血管系統(tǒng)的“動(dòng)力泵”。公司科技提供來自新鮮或冷凍人心肌組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 人心肌組織提取物 | 英文名稱 | Cardiac: Normal Human Cardiac Derivatives | 貨號(hào) | EYX99299 |

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
 操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 鼻疽伯克霍爾德菌核酸檢測試劑盒盒Solanesol1317茄尼醇 馬丘波病毒核酸檢測試劑盒盒 prasterone sulfate997去氫表雄酮硫酸鈉鹽 創(chuàng)傷孤菌核酸檢測試劑盒盒 cholate3619膽酸鈉 蠟樣芽孢核酸檢測試劑盒盒Sitosteryl palmitate285β-谷甾醇棕櫚酸酯 貝氏柯克斯體核酸檢測試劑盒盒Sitostenone581豆甾-烯-酮 Ethyl β-D-apiofuranoside 中文名: 分子式:C7H14O5 豬流感病毒通用型(SIV-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Ethyl rutinoside 中文名:蕓香糖乙苷 分子式:C14H26O10 豬流感病毒通用型(SIV-U)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T Ethyl glucoside 中文名:乙基葡萄糖苷 分子式:C8H16O6 馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Ethyl chlorogenate 中文名:綠原酸乙酯 分子式:C18H22O9 馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T Ethyl 5-amino-4-cyano-3-(2-ethoxy-2-oxoethyl)thiophene-2-carboxylate 中文名: 分子式:C12H14N2O4S 豬球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 十二烷基硫酸鋰 Lithium Dodecyl Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí) 人補(bǔ)體片斷4b(C4b)ELISA檢測試劑盒HumanComplemefragme4b,C4bELISAKit 96T/48T 硫代甜菜堿 8 Sulfobetaine 8 質(zhì)量規(guī)格:>98%,sigma分裝 人補(bǔ)體片斷4b(C4b)試劑盒 Human Compleme fragme 4b,C4b ELISA Kit 硫代甜菜堿 10 Sulfobetaine 10 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人補(bǔ)體片斷5a(C5a)試劑盒 Human Compleme fragme 5a,C5a ELISA Kit 硫代甜菜堿 12 Sulfobetaine 12,SDDAB 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人補(bǔ)體片斷5b(C5b)ELISA檢測試劑盒HumanComplemefragme5b,C5bELISAKit 96T/48T 恩他卡朋;COMT抑制劑 Entacapone 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人補(bǔ)體片斷5b(C5b)試劑盒 Human Compleme fragme 5b,C5b ELISA Kit 曲拉通X-114 Triton X-114 質(zhì)量規(guī)格:BC 人補(bǔ)體因子B前體(pre-CFB)試劑盒 Human compleme factor B precursor,pre-CFB ELISA Kit 曲拉通X-405 Triton X-405 質(zhì)量規(guī)格:70% in H2O 人補(bǔ)體因子H(CFH)試劑盒 Human CFH ELISA Kit CHAPS;3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸 CHAPS 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 人補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1(CFHR1)試劑盒 Human CFHR1 ELISA Kit CHAPSO;3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸 CHAPSO 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí); 人補(bǔ)體因子I(CFI)試劑盒 Human CFI ELISA Kit 二硫赤蘚醇(DTE);1,4-二硫代赤蘚醇 1,4-Dithioerythritol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分sigma 人不對稱二甲基精氨酸(ADMA)ELISA檢測試劑盒Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMAELISAKit 96T/48T 人心肌組織提取物兔p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 83846-85-9 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS 度:98.0% 兔p物質(zhì)(SP)ELISAKit 5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 中文名: 分子式:C7H5ClN2O2 兔p53(p53)ELISA試劑盒 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 83846-85-9 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS 兔p53(p53)ELISAKit 5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde 231278-84-5 中文名: 分子式:C26H17ClFN3O3 兔I型膠原(rabbit Collagen I) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Aza-5androstan-1-ene- 3-one-17carboxylic acid 140700-63-6 中文名: 分子式:C19H27NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: |