小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Mouse Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Endothelial CellsDerivatives】

小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取的，小鼠原代腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

糠秕馬拉色菌 KB1mlAfatinib812阿法替尼

厚皮馬拉色菌 HP1mlAdynerigenin β-neritrioside887219

根癌農(nóng)桿菌EHA51mlAdrenosterone3825腎上腺甾酮

谷氨酸棒狀桿菌ATCC1321mlAdipic dihydrazide713己二酸二酰肼

白色念珠菌ATCC2311mlAdenosine 5'-monophosphate6195'-腺嘌呤核苷酸
Humanplatelet-associatedCompleme3,PAC3ELISAKit人血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (+)-Noe's reagent  87248-50-8  中文名：(+)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑  分子式：C24H38O3 

HumanPlateletassociatedaibody,PA-IgMELISAKit人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Testosterone  1965/6/5  中文名：1-睪酮  分子式：C19H28O2 

HumanplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Naphthol  中文名：  分子式：C10H8O 

Humanplateletactivatingfactor，PAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Monopalmitin  542-44-9  中文名：1-棕櫚酸單甘油酯  分子式：C19H38O4 

Humanplasminogenactivatorinhibitor1，PAI-1ELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1-Indanone  83-33-0  中文名：  分子式：C9H8O
硒吩(>98.0%(GC))  Selenophene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 小鼠胰島素降解酶(IDE)ELISA試劑盒 ，英文名： IDE ELISA Kit

2,2',7,7'-四-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(T))  2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 小鼠胰島素受體(ISR)ELISA試劑盒 ，英文名： ISR ELISA Kit

1,3,6,8-四芘(>98.0%(T))  1,3,6,8-Tetrabromopyrene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 ，英文名： ISR-β ELISA Kit

2,2',7,7'-四-9,9-聯(lián)亞芴基(>98.0%(HPLC))  2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-bifluorenylidene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 小鼠胰島素受體底物1(IRS1)ELISA試劑盒 ，英文名： IRS1 ELISA Kit

酞菁銅(II)(α-型)(>90.0%(T))  Copper(II) Phthalocyanine (α-form)  質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(T) 小鼠胰島素受體底物2(IRS2)ELISA試劑盒 ，英文名： IRS2 ELISA Kit

酞菁銅(II)(β-型)(>90.0%(T))  Copper(II) Phthalocyanine (β-form)  質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(T) 小鼠胰島素樣蛋白3(INSL3)ELISA試劑盒 ，英文名： INSL3 ELISA Kit

三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-鄰二氮雜菲)銪(Ⅲ)(>95.0%(T))  Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T) 小鼠胰島素樣蛋白5(INSL5)ELISA試劑盒 ，英文名： INSL5 ELISA Kit

3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)香豆素(>98.0%(HPLC)(T))  3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 小鼠胰島素樣蛋白6(INSL6)ELISA試劑盒 ，英文名： INSL6 ELISA Kit

 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)香豆素(>98.0%(T))  3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪(升華提)(>96.0%(HPLC))  4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC) 小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA檢測試劑盒MouseInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit 96T/48T
小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物說明書尿激酶型纖溶酶原激活因子 (uPA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3  度：98.0%   

尿蛋白定性測試盒   Acid esterase stain                 3-Quinuclidinone  中文名：3-奎寧環(huán)酮  分子式：C7H11NO 

內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素   英文名稱：   Visfatin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Visfatin  Otophylloside T  1642306-14-6  中文名：  分子式：C48H70O18 

內(nèi)脂素 / 內(nèi)臟脂肪素 (Visfatin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Ondansetron  中文名：昂丹司瓊  分子式：C18H19N3O 

內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素   英文名稱：   Human Glucocoicoid Endogenous   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GC  Androstenediol  521-17-5  中文名：雄烯二醇  分子式：C19H30O2