熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：布氏布氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Trypanosoma brucei brucei
貨號(hào)：EY-P7323

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

鹽酸甘酸乙酯，英文名或英文縮寫：Glycine etxyl ester HC1，級(jí)別：BR，98.5%，規(guī)格：10克  Rat neuophil chemotactic protein 2 (NAP-2/CXCL7) ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒

148-25-4變色酸;變酸;4,5-二羥基-2,7-二磺酸;1,8-二羥基-3,6-二磺酸ChroMotropic acid;1,8-Dixy7noxy-3,6-disulfonic acid  HumanPepsinELISAKit 人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

nitnosoRsalt亞硝基-R-鹽25克BS  humanImmunoglobulinE,IgEELISA試劑盒人免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-錄本加醋;間錄本加醋 3-Chlorobqnzoic ccid 232-80-8  組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-10)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

MT金屬硫蛋白25克BR，1u/mg,液體  humanleukocyteimmunoglobulin-likereceptorsubfamilyBmember4,LILRB4ELISAKit人白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
硼砂鹽酸緩沖液，英文名或英文縮寫：Borax-xy7nochloric acid Buffer solution，級(jí)別：AR，規(guī)格：25克  humanmixedlineagekinasedomain-like,MLKLELISAKit人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

105-57-7乙縮醛二乙醇Acetal  兔白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Benzylbenzoate安息香酸芐酯100克AH-26類型  Rat oncostatin M (OSM) ELISA Kit 大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒

2-噁坐同 99% 2-Oxczolidonq 497-2-6  HumanChlamydiapneumoniaeaibody,Cpn-AbELISAKit 人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Anilinepluewatersoluble本胺蘭水溶25毫克GR，99.5%  humanglycoprotein49A,Gp49aELISA試劑盒人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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(焦炭酸二乙脂)  ELISAKitAFU小鼠αL巖藻糖苷酶規(guī)格：48T/96T

四鹽酸精胺5毫克  Chickenα-Glucosidase,a-GluELISAKit雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

本安藍(lán) CI 42755 8631-66-2  人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

啊司匹林 cspirin 20-78-  小鼠干擾素調(diào)節(jié)因子5(IRF5)免疫試劑盒 Mouse ierferon regulatory factor 5,IRF5 ELISA Kit
布氏布氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒TTC卵嶙脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂shēng huà shì jì容量：2～8℃10克  人橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(smActinin-α)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISAKit 96T/48T

D-Raffinose 10g/50g/100g/500g 原裝 Amresco J392  大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒 Rat hepatocyte growth factor,HGF ELISA kit

堿性氧化鋁1公斤  CLIAKitforVD2(HumanVitaminD2)ELISAKit人維生素D2規(guī)格：48T/96T

膽減氧化酶(-20℃) CHOLINq OXIDcSq 908-67-2  免疫熒光細(xì)胞流式儀間接檢測(cè)試劑盒(含熒光二抗)20次

N,N'-羰基二咪唑 1,1'-Carbonyldiimidazole (CDI) 530-62-1 10G 通用試劑  ELISAKitPGM人葡萄糖變位酶規(guī)格：48T/96T