人子宮頸上皮細(xì)胞提取物【Human Cervix : Normal Cervical Epithelial Cell Derivatives】

人子宮頸上皮細(xì)胞提取物是從人子宮頸上皮細(xì)胞提取的，人子宮頸上皮細(xì)胞從正常人子宮頸組織制備。正常人子宮頸組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

羊源性恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNicorandil651416尼可地爾

鴨源性恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNicarbazin35尼卡巴嗪

豬源性恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNevirapine12961奈偉拉平

NOS基因恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNeutral berberine sulfate3161硫酸黃連素

CaMV35S基因恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNeritaloside4653
Odoroside H  中文名：  分子式：C30H46O8    小鼠多巴胺(DA)ELISAKit  

O-Benzyl-L-tyrosine  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3    小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISAKit  

O-Benzyl-L-serine  中文名：O-芐基-L-絲氨酸  分子式：C10H13NO3    小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISAKit              

n-Tritriacontan-16,18-dione  中文名：  分子式：C33H64O2    中文名稱   方法   規(guī)格

Norfloxacin lactate  中文名：乳酸諾氟沙星  分子式：C19H24FN3O6    小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISAKit
熒光素  Fluorescein  質(zhì)量規(guī)格：AR 人抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)ELISA檢測試劑盒Humanai-thymocyteglobulin,ATGELISAKit 96T/48T

鈣黃綠素  Calcein  質(zhì)量規(guī)格：IND 人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA檢測試劑盒Humaneyemuscleaibody,EMAbELISAKit 96T/48T

瑞氏色素  Wright's stain  質(zhì)量規(guī)格：BS 人抗原處理相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)ELISA檢測試劑盒Humananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISAKit 96T/48T

吉氏色素,姬姆氏色素  Giemsa stain  質(zhì)量規(guī)格：BS 人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)ELISA檢測試劑盒Humanai-apolipoproteinA1aibody,ApoA1ELISAKit 96T/48T

6-FAM, SE;6-羧基熒光素琥珀酯  6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester  質(zhì)量規(guī)格：0.9 人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)ELISA檢測試劑盒HumanAicenomereAibody,ACA/CENPELISAKit 96T/48T

6-FAM ；6-羧基熒光素  6-Carboxyfluorescein  質(zhì)量規(guī)格：0.95 人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體(ATA)ELISA檢測試劑盒Humanai-ophoblastaibody,ATAELISAKit 96T/48T

5-FAM ；5-羧基熒光素  5-Carboxyfluorescein  質(zhì)量規(guī)格：>95% 人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA檢測試劑盒Humanai-Histoneaibody,AHAELISAKit 96T/48T

黑色素(水溶)  Nigrosine water soluble  質(zhì)量規(guī)格：BS 人顆粒溶素(granulysin)ELISA檢測試劑盒HumangranulysinELISAKit 96T/48T

黑色素(醇溶）  Nigrosin alcohol soluble  質(zhì)量規(guī)格：BS 人可溶性0脂酶A2(sPL-A2)ELISA檢測試劑盒HumansolublePhospholipaseA2,sPL-A2ELISAKit 96T/48T

7-羥基香豆素;傘形花內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  7-Hydroxycoumarin  質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)Elisa檢測試劑盒Humansolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit 96T/48T
人子宮頸上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)Tazobactam acid  89786-04-9  中文名：他唑巴坦酸  分子式：C10H12N4O5S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠血小板膜糖蛋白elisa試劑盒   小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒、小鼠血小板膜糖蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Taxilluside A  1661914-46-0  中文名：  分子式：C18H24O10  度：97.5%  關(guān)鍵詞：    小鼠生成素elisa試劑盒   小鼠生成素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠生成素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠生成素試劑盒、小鼠生成素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Tauroursodeoxycholic acid  14605-22-2  中文名：牛磺熊去氧膽酸  分子式：C26H45NO6S  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  膽烷; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子elisa試劑盒   小鼠內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒、小鼠內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Taurocholic acid  81-24-3  中文名：?；悄懰?/span>  分子式：C26H45NO7S  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  膽烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒  

Tapentadol Hydrochloride  175591-09-0  中文名：  分子式：C14H24ClNO  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒