細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）人burkitt淋巴瘤細胞；CA46培養(yǎng)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
我司常期代理ATCC

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產品描述：
細胞名稱 人burkitt淋巴瘤細胞；CA46培養(yǎng)
形態(tài)特性淋巴母細胞樣

生長特性懸浮生長

特征特性該細胞源自Burkitt's淋巴瘤患者的B淋巴細胞，EBNA、Fc陰性。

培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)20%FBS

傳代方法細胞密度在2～3×105cells/ml，飽和密度為2×106，每周換液2～3次

傳代情況C2

凍存條件基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養(yǎng)法（-）

STRAmelogenin：X；CSF1PO：10，12；D13S317：8，12；D16S539：11，12；D18S51：13，16；D19S433：15.2；D21S11：28，29；D2S1338：20，22；D3S1358：16，18；D5S818：13；D7S820：11，12；D8S1179：15；FGA：19，23；TH01：7，9；TPOX：8，9；vWA：15，16；

同工酶

染色體46,XO,XY

注意事項：
?1.一般客戶拿到人burkitt淋巴瘤細胞；CA46培養(yǎng)后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
CD8*犬白細胞分化抗原8規(guī)格48T/96T

CD6*犬白細胞分化抗原6規(guī)格48T/96T

IL-6*犬白介素6規(guī)格48T/96T

IL-4*犬白介素4規(guī)格48T/96T

IL-2*犬白介素2規(guī)格48T/96T

IL-18*犬白介素18規(guī)格48T/96T

IFN-γ*犬γ干擾素規(guī)格48T/96T

GABA*犬γ氨基丁酸規(guī)格48T/96T

β-EP*犬β內啡肽規(guī)格48T/96T

IFN-α*犬α干擾素規(guī)格48T/96T
人burkitt淋巴瘤細胞；CA46培養(yǎng)*Anti-CREB-1環(huán)腺苷酸應答元件結合蛋白抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-phospho-CREB-1(Ser133)磷酸化CREB-1抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-CRF/CRH促腎上腺皮質激素釋放因子抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-CRF/CRH促腎上腺皮質激素釋放因子抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-CRHR1/CRFR1促腎上腺皮質釋放激素受體1抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-CRHR2/CRFR2促腎上腺皮質釋放激素受體2抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-CSIG細胞衰老抑制基因抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Cripto-1(NT)畸胎瘤衍化生長因子抗體(N端)規(guī)格：0.2ml

*Anti-Cripto-1畸胎瘤衍化生長因子抗體(C端)規(guī)格：0.2ml

*Anti-CSMD1CSMD1抗體規(guī)格：0.2ml
冷凍保存細胞之方法：
人burkitt淋巴瘤細胞；CA46培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。