細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）人卵巢癌細胞；Caov-3價格準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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產(chǎn)品描述：
細胞名稱 人卵巢癌細胞；Caov-3價格
形態(tài)特性上皮細胞樣

生長特性貼壁生長

特征特性該細胞1976年建系，源自一位54歲白人女性的卵巢腺癌組織。

培養(yǎng)條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法1:3～1:8傳代，2～3天換液一次

傳代情況P42

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養(yǎng)法（-）

STRAmelogenin：X；CSF1PO：10，13；D13S317：12；D16S539：9；D18S51：18；D19S433：14，17；D21S11：30；D2S1338：16，17；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：10；D8S1179：9，14；FGA：24；TH01：7；TPOX：8，10；vWA：16，18；

同工酶

染色體

注意事項：
?1.一般客戶拿到人卵巢癌細胞；Caov-3價格后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
GSH-Px*人谷胱甘肽過氧化酶規(guī)格48T/96T

GSH*人谷胱甘肽規(guī)格48T/96T

GAD-Ab*人谷氨酸脫羧酶自身抗體規(guī)格48T/96T

GAD*人谷氨酸脫羧酶規(guī)格48T/96T

GDH*人谷氨酸脫氫酶規(guī)格48T/96T

OFQ/N*人孤腓肽規(guī)格48T/96T

Lebtospira*人鉤端螺旋體IgM規(guī)格48T/96T

Lebtospira*人鉤端螺旋體IgG規(guī)格48T/96T

HGV-IgM*人庚型肝炎病毒IgM規(guī)格48T/96T

HGV-IgG*人庚型肝炎病毒IgG規(guī)格48T/96T
人卵巢癌細胞；Caov-3價格*Anti-Phospho-Bad(Ser136)磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Phospho-Bad(Ser155)磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Bcl-6/5原癌基因Bcl-6抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Bcl-10/CLAPBcl-10抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Bcl-xLBcl-xL蛋白抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-BBC3/PUMAp53正向細胞凋亡調(diào)控因子抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-phospho-Bcl-xL(Ser62)磷酸化Bcl-xL(pSer62)抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-BCHE(NT)丁酰膽堿酯酶抗體(N端)規(guī)格：0.1ml

*Anti-BCHE丁酰膽堿酯酶單克隆抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-BCHE(CT)丁酰膽堿酯酶抗體(C端)規(guī)格：0.2ml
冷凍保存細胞之方法：
人卵巢癌細胞；Caov-3價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。