人ELISA試劑盒應該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間和同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工藝的差別,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。因此每一批號的聚苯乙烯制品在使用前須檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔內(nèi)加入適當稀釋的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應后分別測每孔溶液的吸光度。使各讀數(shù)在0.8左右。計算所有讀數(shù)的平均值。所有單個讀數(shù)與平均讀數(shù)之差應小于10%.與聚苯乙烯類似的塑料為聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,聚氯乙烯板的特點為質(zhì)軟板薄,可切割,價廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值有時也略高。
為比較不同固相在某一 ELISA試劑盒定中的優(yōu)劣,可用以下方法加以檢驗:用其他免疫學測定方法選出一個典型的陽性標本和一個典型的陰性標本。將它們分別進行一系列稀釋后,在不同的固相載體上按預定的ELISA操作步驟進行測定,然后比較測定結(jié)果。在哪一種載體上陽性結(jié)果與陰性結(jié)果判別zui大,這種載體就是這一ELISA測定的zui合適的固相載體。
免疫酶技術(shù)利用酶催化底物反應的生物放大作用,提高特異性抗原-抗體免疫學反應檢測敏感性的一種標記免疫技術(shù)。該技術(shù)所用的酶要求純度高、催化反應的轉(zhuǎn)化率高、專一性強、性質(zhì)穩(wěn)定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定,繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力。在受檢標本中不存在與標記酶相同的酶。另外它的相應底物應易于制備和保存,價格低廉,有色產(chǎn)物易于測定,光吸收高。 |