小鼠elisa試劑盒中的酶標(biāo)二抗和顯色液做，陽性值卻很高OD 1.4，這樣看來我的抗原應(yīng)該沒問題，好像問題出在酶標(biāo)二抗上，根據(jù)客戶留言在網(wǎng)上問題解答如下： 先要確定兩種酶標(biāo)二抗使用的是不是同一批包被的板，因?yàn)殡m然是相同的抗原，可能兩次包被不一樣。 如果是同一批板，出現(xiàn)這種情況只能說明你的酶標(biāo)二抗失活了，買新的二抗，按說明書上的稀釋倍數(shù)稀釋；陰性對(duì)照有顏色很可能是沒封閉好。陽性值是由你的抗原抗體間親和力決定的，增加抗原抗體用量，或提高二抗?jié)舛?，但靈敏度可能會(huì)降低，你可以重新摸下工作濃度； 陰性值降低，你可以采用BSA封閉2小時(shí)看看，好像沒聽說有人用FCS封閉的，你可以嘗試采用其他的封閉液，據(jù)我了解，用BSA封閉不是很好，可以試試脫脂奶粉；再就是TMB本身時(shí)間長了就會(huì)略顯色，你可以調(diào)整顯色時(shí)間。 Elisa試劑盒說明： 1．檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法 2．試劑盒保存：-20℃(較長時(shí)間不用時(shí))；2-8℃(頻繁使用時(shí))。 3．濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。 4．小鼠elisa試劑盒中、英文說明書可能會(huì)有不一致之處，請(qǐng)以英文說明書為準(zhǔn)。 5．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。 生物素化CD14IgG 人P27蛋白(P27) 生物素化CD20IgG 人OJ/抗異亮氨酰tRNA合成酶(OJ/IleRS) 生物素化CD4IgG 人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP) 生物素化C-反應(yīng)蛋白IgG 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG) 生物素化癌胚抗原IgG 人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad) 生物素化促甲狀腺素IgG 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT) 生物素化瓜氨酸環(huán)肽 人N端外顯肽(Ext-N) 生物素化腦鈉肽 人N端前腦鈉素(NT-proBNP)
小鼠elisa試劑盒 |
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