小鼠elisa試劑盒的成果斷定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競賽法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類成果怎么判別呢?為您解析: (1)間接法和夾心法 這類反響的定性成果能夠用肉眼判別。目視標(biāo)本也無色或近于無色者判為陰性,顯色明晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反響后常可呈現(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的構(gòu)成和試驗的條件不一樣而異,因而試驗中有必要加測陰性對照。陰性對照的構(gòu)成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判別成果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標(biāo)本陽性的指標(biāo)。 目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應(yīng)該用比色計測定吸光值,這樣能夠得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行核算。核算方法有多種,大致可分為陽性斷定值法和標(biāo)本與陰性對照比值法兩類。 a.陽性斷定值 陽性斷定值(cut-off value)通常為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為判別成果陽性或陰性的規(guī)范。 用此法判別成果請求試驗條件非常穩(wěn)定,試劑的制備有必要規(guī)范化,陽性和陰性的對照品應(yīng)契合必定的規(guī)范,須配用精細的儀器,并嚴(yán)厲按規(guī)則操作。陽性斷定值公式中的常數(shù)是在這特定的體系中經(jīng)過對很多標(biāo)本的試驗檢查而得到的?,F(xiàn)舉某種檢查HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml。每次試驗設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先核算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(P-N)有必要大于一個特定的數(shù)值(例0.400),試驗才有用。3個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此規(guī)模,則棄去,而已另兩個陰性對照從頭核算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上規(guī)模,則該次試驗無效。陽性斷定值按下式核算:陽性斷定值=NCX+0.05,標(biāo)本A值>陽性斷定值的為陽性,小于陽性斷定值的為陰性。應(yīng)留意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。 依據(jù)以上敘說能夠看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質(zhì)控效果,試劑變質(zhì)和操作不妥均會發(fā)生"試驗無效"的成果。 b.標(biāo)本/陰性對照比值 小鼠elisa試劑盒在試驗條件(包括試劑)較難確保穩(wěn)定的情況下,ELISA試劑盒這種判別法較為適宜。在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的A值后,核算S/N值。也有寫作P/N的,這兒的P不代表陽性(positive),而是患者(patient)的縮寫,不該誤解。為防止混雜,更宜用S/N表明。在前期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性規(guī)范,現(xiàn)多為各種測定所沿襲。實際上每一測定體系應(yīng)該用試驗求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)留意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,致使反響后發(fā)生的本底也許較正常人血清的本底低得多。因而,這類試劑盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按0.05核算,不然將呈現(xiàn)假陽性成果。 含量測定 L-羥脯氨酸 對照品 111578-200201 50mg 鑒別 降香揮發(fā)油 對照品 111579-200201 0.2ml UV法含量測定 甲基橙皮苷 對照品 111580-200503 20mg 含量測定 紫菀酮 對照品 111581-200403 20mg 含量測定 青陽參苷元 對照品 111582-200201 20mg 含量測定 二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯 對照品 111583-200301 20mg 西紅花苷-I 對照品 111588-200501 20mg 西紅花苷-II 對照品 111589- 20mg 小鼠elisa試劑盒 |