在完成殘留ELISA測試盒(抗生素殘留)的操作過程中,確保每一步都精確無誤是至關(guān)重要的。接下來,我們將繼續(xù)介紹該測試盒的操作步驟,以便實驗者能夠順利完成檢測。
在加入樣本和試劑后,輕輕搖晃微孔板,確保溶液充分混合。這一步驟有助于加速抗原與抗體的結(jié)合反應(yīng),提高測試的準確性。隨后,將微孔板放入恒溫箱中,按照說明書的溫度和時間進行孵育。孵育期間,應(yīng)避免微孔板受到任何形式的震動或干擾,以免影響測試結(jié)果。
孵育結(jié)束后,取出微孔板,用洗滌液仔細清洗每個孔。洗滌的目的是去除未結(jié)合的抗原和抗體,減少背景噪音,從而提高測試的靈敏度。在洗滌過程中,要確保每個孔都被充分清洗,同時避免交叉污染。
清洗完畢后,向每個孔中加入適量的酶標抗體。酶標抗體能夠與樣本中的抗原特異性結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗體復(fù)合物。再次將微孔板放入恒溫箱中進行孵育,使酶標抗體與抗原充分結(jié)合。
孵育完成后,加入底物溶液,觀察顏色變化。底物在酶的作用下會發(fā)生化學反應(yīng),產(chǎn)生顏色變化,這種顏色變化的程度與樣本中抗生素的濃度成正比。通過比較樣本孔與標準孔的顏色深淺,可以初步判斷樣本中抗生素的殘留情況。
使用酶標儀測定每個孔的光密度值,根據(jù)標準曲線計算出樣本中抗生素的具體濃度。至此,整個殘留ELISA測試盒(抗生素殘留)的操作步驟全部完成。 |