PrimaCell™大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞試劑盒細(xì)胞培養(yǎng)方法; 1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%yi酶(T25瓶),使yi酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細(xì)胞復(fù)蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。 3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%yi蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。 生物磁珠:羧基磁珠 酸洗玻璃珠系列 微量單鏈DNA定量試劑盒樣品預(yù)處理 白細(xì)胞裂解液 非凍型尿液DNA保存液 非凍型尿液DNA保存液 非凍型拭子DNA保存液(A型) 非凍型拭子DNA保存液(B型) 非凍型血液DNA保存液(100 mL) 非凍型血液DNA保存液(250 mL) 非凍型組織DNA保存液(100 mL) 紅細(xì)胞裂解液A型(核酸純化) 紅細(xì)胞裂解液B型(流式細(xì)胞分析用) 菌體內(nèi)毒素清除劑 土壤腐殖酸清除劑 一步離心式石蠟清除劑 動(dòng)物DNA提取 96孔板血液DNAout(真空法)(見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 96孔板血液DNAout(離心法)(1次) 96孔板血液DNAout(離心法)(5次) FTA血片DNAout(見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) Southern級(jí)動(dòng)物DNAout Southern級(jí)血液DNAout(見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 百萬(wàn)堿基級(jí)動(dòng)物DNAout(見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 百萬(wàn)堿基級(jí)血液DNAout(見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 磁珠動(dòng)物DNAout 磁珠血液DNAout 大提柱式動(dòng)物DNAout 大提柱式血液DNAout 凋亡DNAout
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