羊偽狂犬病毒IgG抗體ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟 (﹡使用前應(yīng)輕輕旋轉(zhuǎn)或震蕩予以混勻,所有試劑應(yīng)平衡至室溫) 1 在A1和A2孔中分別加入100μl陰性對(duì)照; 2 在A3和A4孔中分別加入100μl陽(yáng)性對(duì)照; 3 取100μl經(jīng)1:100稀釋好的待檢樣品加入相應(yīng)孔中,并做好記錄; 4 37℃孵育30min; 5 將各孔的液體棄入廢液桶,每孔加250μl的洗滌液(試劑盒內(nèi)20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結(jié)晶,需先溶解后,方可進(jìn)行稀釋)進(jìn)行洗板,重復(fù)5次,每次30s; ﹡加液時(shí)防止各孔間洗滌液串流影響檢測(cè)結(jié)果,盡量將孔內(nèi)洗滌液拋甩干凈; 6 每孔加100μl酶標(biāo)結(jié)合物; 7 37℃孵育30min;重復(fù)步驟3.5; 9 每孔加100μl底物液; 9 37℃孵育10min(避光顯色); 10 每孔加100μl的終止液; 11 立刻于450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的吸光度值,即OD450值。 |