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枝頂孢霉染料法熒光定量PCR試劑盒數(shù)據(jù)采集及處理方法
點擊次數(shù):786 更新時間:2020-04-21

枝頂孢霉染料法熒光定量PCR試劑盒數(shù)據(jù)采集

具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合 DNA 時,大吸收光譜在 471 nm,結(jié)合 DNA 時的大吸收光譜在 500 nm,大發(fā)射光譜在 530 nm。信號采集可以設(shè)置在復性或延伸步驟。

數(shù)據(jù)處理

1. 如果把本試劑盒用于定量檢測,則以陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品的 Ct 值從標準曲線上推算出樣品 DNA 濃度的log 值,再推算出其濃度。

2. 如果把本試劑盒用于定性檢測,只判斷陽性或陰性,則陰性對照 Ct 必須大于或等于 40。陽性對照必須有熒光對數(shù)增長,有典型擴增曲線,Ct 值應該小于或等于30。對待測樣品,如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性,如果小于或等于 35 則為陽性。如果在 35-40 之間,則重復一次。重復實驗的 Ct 值如果大于或等于 40 則為陰性,如果小于 40,則為陽性。

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