大丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶elisa檢測試劑盒檢測系統(tǒng)可以說是現(xiàn)在運用zui多的檢測辦法，并且技術(shù)手段許多，關(guān)于花板，假陽性，全顯色，悉數(shù)顯色，顯色比空缺還低，這些都起到了至關(guān)重要的效果，必定要多留心，那么elisa檢測系統(tǒng)安穩(wěn)，這些實驗進程都要留心。 包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其辨認，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴厲正告我必定要在冰浴下緩慢消融就是這個道理。封suo就是讓很多不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地閑暇，然后排擠ELISA后的過程中攪擾物質(zhì)的再吸附。但有時由于實驗的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。 還有有的包被原可能不是蛋白，關(guān)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事前對其改造再加以包被，親和素生物素:先親和素先包被載體，參加生物素化的DNA，這種包被辦法均勻、結(jié)實，已擴展應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。常用的包被液除了剛才說到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。 應(yīng)留心以下原理：由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是經(jīng)過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體外表的疏水基團間的效果，這種物理吸附長短特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)一般含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體外表。小分子必需依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才干固定在固相載體上。 |
