常有人ELISA試劑盒操作者抱怨試驗復(fù)雜，而經(jīng)驗豐富的老師們會覺得很簡便，一是熟能生巧，二是把握了其間的隱秘。 ELISA隱秘要點之加樣： 在ELISA試劑盒中除了包被外，一般需進(jìn)行45加樣。在定性測定中有時不強調(diào)加樣量的性，此刻應(yīng)該運用相同口徑的滴管，保持的加樣姿勢，使每滴液體的體積根本相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)則配制。加樣時應(yīng)將液體加在孔底，防止加在孔壁上部，并留意不可出現(xiàn)氣泡。 ELISA隱秘要點之洗刷： 洗刷在ELISA試劑盒過程中不是反響聚，但卻是決議試驗勝敗的關(guān)鍵。洗刷的目的是洗去反響液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反響過程中非特異性吸附于固相載體的攪擾物質(zhì)。洗刷如不*，特別在zui后一次，如有酶結(jié)合物的非特異性吸附，將使空白值升高。別的，在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈，也將與酶標(biāo)抗體效果而產(chǎn)生攪擾。 |
