溫育是小鼠ELISA試劑盒測(cè)定中影響測(cè)定成敗zui為樞紐的一個(gè)因素。目前臨床上使用血清標(biāo)本測(cè)定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。試劑的加入在國(guó)產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要留意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很輕易泛起重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會(huì)在孔內(nèi)的非包被區(qū)泛起非特異吸附,從而引起非特異顯色。 臨床ELISA測(cè)定現(xiàn)通常為采用手工操縱的以微孔板條為固相的測(cè)定模式,測(cè)定操縱非常簡(jiǎn)樸,一般涉及到標(biāo)本的收集保留、試劑預(yù)備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判定和結(jié)果講演及解釋等方面,其中任一步驟的不當(dāng)都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。濺出會(huì)對(duì)臨近孔產(chǎn)生污染。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測(cè)的血清標(biāo)本的收集則沒有時(shí)間和體位方面的影響。ELISA試劑盒作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相長(zhǎng)進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,必需在一定的溫度前提下反應(yīng)一定的時(shí)間。 |