目前常用的幾種大鼠elisa試劑盒方法有：測(cè)定抗體的間接法，測(cè)定抗原的雙抗體夾心法和測(cè)定抗原的競爭法等。本實(shí)驗(yàn)采用間接法測(cè)定單克隆抗體效價(jià)。其主要過程為：首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應(yīng)板的凹孔內(nèi)，加待測(cè)抗體，保溫后洗滌以除去未結(jié)合的雜蛋白質(zhì)，加酶標(biāo)抗抗體，保溫后洗滌，加底物保溫30分鐘后，加酸或堿終止酶促反應(yīng)，用目測(cè)或光電 比色測(cè)定抗體量。
ELISA試劑盒檢測(cè)系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研出產(chǎn)中zui為敏捷的技術(shù)手段。自己也為此苦惱過很長一段時(shí)間，跟著自己技術(shù)水平得進(jìn)步，或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣，也是熟能生巧吧，現(xiàn)在做方陣，做ELISA已是輕車熟路了，以前檢測(cè)一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的，現(xiàn)在給我十個(gè)八個(gè)的從包被到顯色，一個(gè)工作日基本搞定?？墒窃谛吕鲜植倏v過程中老是會(huì)泛起或大或小的題目，本人在剛開始做ELISA時(shí)就面對(duì)良多災(zāi)題，固然有師兄師姐鋪路，但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣，好比說花板，假陽性，全顯色，全部顯色。
①抗原包被：兔抗人IgG 作為抗原，用包被液l：8000稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。
②洗滌：次日傾去凹孔內(nèi)的液體，洗滌液洗3次。
③封閉：加l00μL/孔封閉液，室溫放置0.5h.
④洗滌：用洗滌液洗3次。
⑤加待測(cè)樣品(一抗)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清在另-塊板上用PBS 連續(xù)稀釋(按照1：2或1：10)，100μL /孔加到 已包被的板上，大鼠elisa試劑盒每個(gè)樣品平行做兩份，PBS或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，已知樣品作為陽性對(duì)照。加蓋37℃恒溫箱溫育 1~2h。
⑥洗滌：用洗滌液洗3次。
53-19-0 Mitotane 500mg 米托擔(dān)標(biāo)準(zhǔn)品
52-24-4 Thiotepa 500mg 三亞乙基硫代磷酰胺標(biāo)準(zhǔn)品
517-43-1 Sennosides 500mg 番瀉苷標(biāo)準(zhǔn)品
51-48-9 Levothyroxine 500mg 左旋甲狀腺素標(biāo)準(zhǔn)品
50-99-7 Dextrose 500mg 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品
50-78-2 Aspirin 500mg 阿司匹林標(biāo)準(zhǔn)品
50-63-5 Chloroquine Phosphate 500mg 磷酸氯喹標(biāo)準(zhǔn)品
50-41-9 Clomiphene Citrate 500mg 枸櫞酸氯米芬標(biāo)準(zhǔn)品
50-28-2 Estradiol 500mg 雌二醇標(biāo)準(zhǔn)品
5002-47-1 500mg 癸氟奮乃靜標(biāo)準(zhǔn)品
4691-65-0 Disodium Inosinate 500mg 肌苷酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠elisa試劑盒 |
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