小鼠elisa試劑盒采用酶標(biāo)抗抗體檢查多種大分子抗原
此法與雙抗體夾心ELISA的主要區(qū)別在于：小鼠elisa試劑盒它是采用酶標(biāo)抗抗體檢查多種大分子抗原，它不僅不必標(biāo)記每一種抗體，還可提高試驗的敏感性。此法的基本程序為：
① 加抗體（Ab-1）包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干
② 加待檢抗原（Ag） → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干
③ 加用非同種動物的特異性抗體（Ab-2)→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干
④ 加入酶標(biāo)抗Ab-2抗體（AB-3）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干
⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液
⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。 小鼠elisa試劑盒競爭ELISA 此法主要用于測定小分子抗原及半抗原，其原理類似于放射免疫測定。其基本程序為：
① 抗體包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干
② 加入待檢抗原及一定量的酶標(biāo)抗原（對照孔僅加酶標(biāo)抗原）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干
③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液
④ 用ELISA檢測儀測定OD值。
被結(jié)合的酶標(biāo)抗原的量由酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物的量來確定，如果待檢溶液中抗原越多，被結(jié)合的標(biāo)記抗原的量就越少，有色產(chǎn)物就減少，這樣根據(jù)有色產(chǎn)物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優(yōu)點在于快速、特異性高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測；其主要不足在于每種抗原都要進行酶標(biāo)記，而且因為抗原的結(jié)構(gòu)不同，還需應(yīng)用不同的結(jié)合方法。此外，試驗中應(yīng)用酶標(biāo)抗原的量較多。 |
