ELISA試劑盒試驗中呈現(xiàn)負(fù)值
A：1）ELISA試劑盒血清中有些細(xì)胞因子的檢出率很低，血清中又富含許多大分子雜蛋白，在血清濃度較高時簡單隱瞞抗原的表位，因此在測血清原液時常呈現(xiàn)負(fù)值。這即是在咱們的闡明書中主張檢查血清時做1:2稀釋的因素。除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀釋外，其它一些細(xì)胞因子都要做1:2稀釋（這在咱們的闡明書中有提示）。做法是：先在樣本孔中加50ul試劑稀釋液（試劑盒中已備），再加50ul樣本。求出樣本含量后需求乘上稀釋倍數(shù)2。
2）ELISA試劑盒試驗假如按上訴辦法處理后檢查仍有負(fù)值，則處理數(shù)據(jù)時可以采納2個辦法：
a：規(guī)范曲線只取規(guī)范曲線的下面4~5個點，即125，62.5，31.25，15.625，7.8，0，或62.5，31.25，15.625，7.8、3.9、0。原則是把樣本的OD值全包含，規(guī)范曲線又能至少有4個點。也即是把規(guī)范曲線的下端（即樣本含量會集的這一段）擴大，求出的數(shù)據(jù)更牢靠。
b：ELISA試劑盒人為的把“0”pg/ml點OD值下降。原則是把“0”OD值降到比zui低的樣本OD略低一點，盡可能使樣本的含量滿是正值，一起確保變化“0”OD值后的規(guī)范曲線的相關(guān)系數(shù)（r）＞0.98。這樣變化后，通常樣本都能得到數(shù)據(jù)，低的樣本出來了，高的樣本含量也會高一些。因為計算時是相對含量的對比，所以不會影響ELISA試劑盒試驗計算成果。 |
