提取得到RNA溶液后，我們需要對RNA進(jìn)行相關(guān)的質(zhì)量檢測，以確
定它是否符合后續(xù)實驗的要求。RNA用于不同的后續(xù)實驗，對其質(zhì)
量要求不盡相同。cDNA文庫構(gòu)建要求RNA完整且無酶等抑制物殘
留；Northern blot實驗對RNA完整性要求較高，對酶反應(yīng)抑制物殘
留要求較低；RT-PCR實驗對RNA完整性要求不太高，但對酶反應(yīng)
抑制物殘留要求嚴(yán)格。因此在進(jìn)行不同的實驗時應(yīng)選擇不同的方法
純化RNA，以達(dá)的實驗效果。
RNA得率檢測——分光光度計法
RNA得率有很強的組織特異性，不同組織RNA的豐度和RNA提取的
難易程度共同決定了該種組織的RNA得率。一般來說，可通過分光
光度計測定RNA溶液在260nm處的吸光值來計算RNA的含量。RNA
溶液在260、320、230、280nm下的吸光度分別代表了核酸、溶液
渾濁度、雜質(zhì)（多肽、苯酚等）濃度和蛋白等有機(jī)物的吸收值。用標(biāo)
準(zhǔn)樣品測得在波長260nm處，1μg/ml RNA鈉鹽吸光度為0.025（光
程為1cm），即OD260=1時，樣品中RNA濃度為40μg/ml。通常分光
光度計OD260的讀數(shù)要介于0.15-1.0之間才是可靠的，因此RNA提
取結(jié)束后，要根據(jù)大概產(chǎn)量稀釋到適當(dāng)濃度范圍，再用分光光度計 |
