HPV DNA 的PCR擴(kuò)增 評(píng)價(jià)HPV檢測(cè)方法zui關(guān)鍵的因素是檢測(cè)靈敏度，以基因擴(kuò)增為基礎(chǔ)檢測(cè)HPV DNA，是目前zui靈敏的檢測(cè)方法，可檢測(cè)出低水平的病毒感染，并且能夠比較準(zhǔn)確地對(duì)HPV感染狀態(tài)進(jìn)行分類(lèi)，因此成為實(shí)驗(yàn)室和流行病學(xué)研究的理想工具。但是，由于基因擴(kuò)增過(guò)程中污染造成的假陽(yáng)性及技術(shù)成本高，目前不宜作為臨床實(shí)驗(yàn)室HPV感染的常規(guī)檢測(cè)。ELISA試劑盒 熒光定量PCR (FQ-PCR) 技術(shù) FQ-PCR是1995年由美國(guó)Perkin Flmer公司研制成功的一種新型核酸定量檢測(cè)方法，該法將普通PCR的高靈敏性、DNA雜交的高特異性和光譜技術(shù)的高性有機(jī)結(jié)合，克服了傳統(tǒng)PCR在許多方面的缺點(diǎn)和局限性。由于熒光探針的引入，而且被釋放的熒光基團(tuán)數(shù)目與PCR產(chǎn)物數(shù)量相同，使得該方法對(duì)DNA模板定量的準(zhǔn)確性與特異性都有很大提高。常用的PCR擴(kuò)增儀與傳統(tǒng)PC R擴(kuò)增儀相比，應(yīng)用更廣泛、定量測(cè)量、檢測(cè)效率明顯提高、擴(kuò)增產(chǎn)物無(wú)需電泳分析、無(wú)管道內(nèi)污染及結(jié)果重復(fù)性好等特點(diǎn)。由于HPV-16型特異引物可與HPV66型模板DNA發(fā)生錯(cuò)配，傳統(tǒng)PCR法擴(kuò)增時(shí)，常對(duì)兩者的擴(kuò)增產(chǎn)物不易區(qū)分而造成HPV 16假陽(yáng)性結(jié)果，但應(yīng)用FQ-PCR技術(shù)，HPV 66型DNA不能擴(kuò)增，從而增強(qiáng)了HPV分型檢測(cè)的特異性。此外，F(xiàn)Q-PCR技術(shù)檢測(cè)HPV感染的敏感性較傳統(tǒng)PCR法增高，當(dāng)HPV16, 18, 31, 33, 35亞型含量平均為1拷貝基因組/300個(gè)細(xì)胞時(shí)，即可用此法檢測(cè)到。ELISA試劑盒 |
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