要防止菌種衰退，應(yīng)該做好保藏工作，使菌種優(yōu)良的特性得以保存，盡量減少傳代次數(shù)。如果菌種已經(jīng)發(fā)生退化，產(chǎn)量下降，則要進(jìn)行分離復(fù)壯。 (1)菌種的分離菌種發(fā)生衰退的同時(shí)，并不是所有的菌種都衰退，其中未衰退的菌體往往是經(jīng)過(guò)環(huán)境條件考驗(yàn)的、具有更強(qiáng)生命力的菌體。因此，采用單細(xì)胞菌株分離的措施，即用稀釋平板法或用平板劃線法，以取得單細(xì)胞所長(zhǎng)成的菌落，再通過(guò)菌落和菌體的特征分析和性能測(cè)定，就可獲得具有原來(lái)性狀的菌株，甚至性能更好的菌株。如對(duì)芽胞桿菌，可先將菌液用沸水處理幾分鐘，再用平板進(jìn)行分離，從所剩下的胞子中挑選出*的菌體。如果遇到某些菌株即使進(jìn)行單細(xì)胞分離仍不能達(dá)到復(fù)壯的效果，則可改變培養(yǎng)條件，達(dá)到復(fù)壯的目的。如AT3．942棲土曲霉的產(chǎn)孢子能力下降，可適當(dāng)提高培養(yǎng)溫度，恢復(fù)其能力。同時(shí)通過(guò)實(shí)驗(yàn)選擇一種有利于高產(chǎn)菌株而不利于低產(chǎn)菌株的培養(yǎng)條件。 (2)菌種的復(fù)壯菌種的復(fù)壯有狹義的復(fù)壯和廣義的復(fù)壯之分。狹義的復(fù)壯指的是菌種已經(jīng)發(fā)生衰退后，再通過(guò)純種分離和性能測(cè)定等方法，從衰退的群體中找出尚未衰退的少數(shù)個(gè)體，以達(dá)到恢復(fù)該菌種原有典型性狀的一種措施。而廣義的復(fù)壯應(yīng)該是一種積極的措施，即在菌種的性能尚未衰退前就經(jīng)常有意識(shí)地進(jìn)行純種分離和性能的測(cè)定工作，使菌種的性能逐步提高，所以，這實(shí)際上是一種利用自發(fā)突變(正突變)從中不斷進(jìn)行選種的工作。 (3)提供良好的環(huán)境條件進(jìn)行合理的傳代，減少傳代次數(shù)可防止由于菌種的遺傳穩(wěn)定性變化而引起的自發(fā)突變，以及由于環(huán)境條件變化導(dǎo)致的退化。菌種允許使用的傳代次數(shù)必須通過(guò)傳代的穩(wěn)定性試驗(yàn)確定。發(fā)酵上一般只用三代內(nèi)的菌種。采用合適的傳代條件使培養(yǎng)條件有利于高產(chǎn)菌的生長(zhǎng)，而不利于低產(chǎn)菌的生長(zhǎng)，減少突變的發(fā)生。細(xì)胞 (4)用優(yōu)良的保藏方法盡可能采用諸如斜面冰箱保藏法、砂土管保藏法、真空冷凍干燥保藏法以及采用干孢子保藏等*的保藏方法保藏菌種，以防止菌種的衰退。 (5)定期純化菌種對(duì)菌種進(jìn)行定期的分離純化，可減少其中自發(fā)突變菌株或“突變不*”產(chǎn)生的退休型菌株的增殖機(jī)會(huì)，保持原來(lái)的優(yōu)良特性。諸如對(duì)營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌種在純化過(guò)程中提供足夠的營(yíng)養(yǎng)物，以保持菌株的優(yōu)勢(shì)，避免回復(fù)突變體的競(jìng)爭(zhēng)。同樣在進(jìn)行抗性突變的菌種純化時(shí)在培養(yǎng)基中加入對(duì)應(yīng)于抗性的藥物，可保持菌株的抗性優(yōu)勢(shì)，避免產(chǎn)生無(wú)抗性的回復(fù)突變體。采用遺傳性穩(wěn)定的菌體作為菌種、合適的培養(yǎng)基傳代等可減少和防止菌種的自身突變。細(xì)胞 |
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