透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室zui 簡(jiǎn)便zui常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過(guò)程中,除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除 去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。 透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品 溶液置入袋內(nèi), 將此透析袋浸入水或緩沖液中, ELISA樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留 在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液",袋(膜)外的溶液稱為“滲出液"或“透析 液"。 透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜 的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度, 通常是 4℃透析,升高溫度可加快透析速度。 透析膜可用動(dòng)物膜和玻璃紙等,但用的zui多的還是用纖維素制成的透析膜,目前常用的 是美國(guó) Union Carbide (聯(lián)合碳化物公司)和美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)公司的各種尺寸的透析管, 截留分子量 MwCO(即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的zui小分子量,縮寫(xiě)為 MwCO)通常為 1 萬(wàn)左右。 商品透析袋制成管狀,其扁平寬度為 23 mm~50 mm 不等。為防干裂,出廠時(shí)都用 10% 的甘油處理過(guò),并含有極微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì),它們對(duì)蛋白質(zhì) 和其它生物活性物質(zhì)有害,用前必須除去??上扔?50%乙醇煮沸 1 小時(shí),再依次用 50%乙 醇、0.01 mol/LELISA 碳酸氫鈉和 0.001 mol/L EDTA 溶液洗滌,zui后用蒸餾水沖洗即可使用。實(shí) 驗(yàn)證明, 50%乙醇處理對(duì)除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。 大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 96T/48T 大鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 96T/48T 大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT 96T/48T 大鼠抑制素B(INH-B)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat inhibin B,INH-B ELISA Kit 96T/48T 大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit 96T/48T 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit 96T/48T 大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat Gelsolin ELISA Kit 96T/48T 大鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T ELISA 大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit 96T/48T 大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA 檢測(cè)試劑盒Rat Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit 96T/48T |